欧美黑人性猛交╳xx╳动态图_国产男女打野战在线观看_日本激情电影免费完整版_欧美精品日本一级特黄

 
 

首頁 > 研發(fā)中心 > 創(chuàng)新動態(tài)
 

CD161,踟躕在成藥的十字路口(上)
2021-04-20 訪問次數(shù):5811

? ? ? ?近期“生物世界”的一篇原創(chuàng)文章,介紹了Cell在今年2月15日發(fā)布的“Inhibitory CD161 receptor identified in glioma-infiltrating T cells by single-cell analysis”(圖1)。這篇論文的高光之處在于,單細(xì)胞在組織內(nèi)成像的技術(shù),實(shí)現(xiàn)了單細(xì)胞級別的蛋白表達(dá)檢測。并且,文中提出了類似于免疫治療的思路,將CD161視為潛在的治療靶點(diǎn),阻斷CD161以激活細(xì)胞毒性T細(xì)胞(圖2)。


圖1 Cell最近發(fā)布的關(guān)于CD161的文章。高光之一:高技術(shù),單細(xì)胞級別檢測CD161在T細(xì)胞的表達(dá),這些T細(xì)胞滲透進(jìn)入了神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織。

圖2 高光之二:證明機(jī)制,具有細(xì)胞毒性的T細(xì)胞,也表達(dá)多種NK細(xì)胞受體。其中NK細(xì)胞表達(dá)的抑制型受體CD161,在T細(xì)胞也有表達(dá),通過結(jié)合免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞表達(dá)的CLEC2D,體現(xiàn)抑制活性。通過阻斷CD161與CLEC2D的結(jié)合,可以激活T細(xì)胞的活性。

一、給你一張過去的CD
? ? ? ?CD161,別名NKRP1A(NK受體P1A)、KLRB1、CLEC5D,以下均稱為CD161。其中,KLRB1(killer cell lectin-like receptor subfamily B1)是推薦的名稱,中文翻譯為“殺傷細(xì)胞的類凝集素受體亞家族B成員1號”。CD161目前只發(fā)現(xiàn)一種序列,沒有其他變體。
? ? ? ?LLT1,別名CLEC2D(前言的Cell所稱),以下均稱為LLT1,作為CD161的配體。LLT1(lectin-like transcript 1)為CLEC2D的1號變體,中文翻譯“類凝集素轉(zhuǎn)錄體1”。這意味著CLEC2D存在多個變體,其中只有變體1,即LLT1,具有結(jié)合CD161的能力,且能夠激活下游信號。其他變體,比如變體2、4,不結(jié)合CD161。
? ? ? ?CLEC,C-type lectin domain family,可見CD161和LLT1同屬于這個大家族,分屬不同的亞家族。
? ? ? ?CD161和LLT1的表達(dá)
? ? ? ?CD161主要表達(dá)于粒細(xì)胞,以及單個核細(xì)胞的表面(圖3A),表達(dá)特異性較好。單個核細(xì)胞,包括NK細(xì)胞和T細(xì)胞,其中T細(xì)胞包括Th17、NK T、記憶T細(xì)胞,但不包括原始T細(xì)胞(圖3B)。另外,IL-17的表達(dá)與CD161的表達(dá)有極大的相關(guān)性,比如CD4+ TCRαβ+、CD8+ TCRαβ+、CD4-CD8- TCRαβ+、CD4-CD8-TCRγδ+等產(chǎn)生IL-17的細(xì)胞,它們存在CD161表達(dá)。另外,CD161+的細(xì)胞,IL-23R和RORC的表達(dá)量顯著高于CD161-的細(xì)胞。
? ? ? ?LLT1主要表達(dá)在小腸的派爾淋巴結(jié),以及粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞(包括B細(xì)胞、T細(xì)胞、NK細(xì)胞)、扁桃體、肺、腎上腺、腎等部位(圖3C)。外周循環(huán)的B細(xì)胞、T細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞,在靜息狀態(tài)下,不表達(dá)LLT1,但是激活后,比如TLR(toll-like receptor)激活的類漿細(xì)胞、單核細(xì)胞衍生的樹突狀細(xì)胞、激活的B細(xì)胞,都一定程度地表達(dá)LLT1,對NK細(xì)胞有抑制作用,但對T細(xì)胞具有激活作用。

圖3A,CD161在粒細(xì)胞和單個核細(xì)胞中高表達(dá),主要在淋巴組織表達(dá),摘自bgee.org。

圖3B,CD161的表達(dá)情況,分別在患者的上皮組織內(nèi)淋巴細(xì)胞(灰)、肝淋巴細(xì)胞(白)、外周血淋巴細(xì)胞,分別是大約75%、60%、20%。其中,上皮組織內(nèi)的CD3+CD161+陽性的天然T細(xì)胞,顯著高于CD3-CD161+的NK細(xì)胞。

圖3B,LLT1在小腸的派爾淋巴結(jié)高表達(dá),主要在淋巴節(jié)和粒細(xì)胞表達(dá),摘自bgee.org。
? ? ? ?CD161和LLT1的信號通路
? ? ? ?CD161在NK細(xì)胞上,作為抑制型受體,通過與其配體LLT1(CLEC2D)的結(jié)合,抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性,抑制IFN-γ的釋放(圖4A)。也有研究表明,在T細(xì)胞上,尤其是Th17上,CD161可作為其細(xì)胞亞群標(biāo)記,為激活型受體,激活Th17表達(dá)和分泌IL-17(圖4B)。也可以通過TCR信號通路激活T細(xì)胞,促進(jìn)IFN-γ的釋放。

圖4A,NK細(xì)胞機(jī)制。LLT1表達(dá)在特殊的腫瘤組織中,比如三陰性乳腺癌(TNBC)、前列腺癌、B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞。表達(dá)于腫瘤細(xì)胞表面的LLT1,與NK細(xì)胞表達(dá)的CD161結(jié)合,給出抑制信號,降低其細(xì)胞毒性。LLT1在部分腫瘤組織中高表達(dá),以抑制NK細(xì)胞的殺傷。

圖4B,T細(xì)胞機(jī)制。神經(jīng)磷脂酶(ASM),調(diào)節(jié)CD39和CD161的細(xì)胞內(nèi)信號,并促使Th17的增殖。在Th17分化條件下,CD4+ T細(xì)胞內(nèi),MHC/CD3/CD28,以及IL-6的刺激信號,激活mTOR和STAT3信號。同時,CD39和CD161的刺激信號進(jìn)一步增強(qiáng)了上述信號,最終導(dǎo)致Th17增殖,以及分泌IL-17。
? ? ? ?CD161的胞內(nèi)區(qū)并沒有NK細(xì)胞受體常見結(jié)構(gòu)域的ITIM,即“免疫受體中基于酪氨酸的抑制型模體”,或ITAM,激活性模體。因此,CD161激活后的下游信號,不同于常見的NK細(xì)胞受體激活模式,并且在NK、T細(xì)胞中可能產(chǎn)生了不同的結(jié)果:一方面,胞內(nèi)域通過與CD39的結(jié)合,激活神經(jīng)磷脂酶(ASM、SMPD1),通過STAT3、mTOR等通路,上調(diào)細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)酰胺的表達(dá);另一方面,激活A(yù)KT1/PKB和RPS6KA1/RSK1激酶和下游信號,這與通過CD3激活T細(xì)胞的通路一致。
? ? ? ?研究表明,CD161的表達(dá),受IL-12調(diào)控,依賴于IL-12作用時間和劑量。IL-12可提高NK細(xì)胞表面的CD161,進(jìn)而抑制NK細(xì)胞活性,這是一個負(fù)反饋的過程。另一方面,IFN-β可導(dǎo)致CD161表達(dá)降低。?
? ? ? ?CD161和LLT1的結(jié)構(gòu)和修飾
? ? ? ?CD161是一種二型的穿膜糖蛋白,存在3對鏈內(nèi)二硫鍵,以及1個N糖基化位點(diǎn)(圖5)。
? ? ? ?LLT1也是一種二型的穿膜糖蛋白,存在2對鏈內(nèi)二硫鍵,以及2個N糖基化位點(diǎn)(圖5)。
? ? ? ?二型的穿膜蛋白,即N端為胞內(nèi)域,C端為胞外域。

圖5 CD161的結(jié)構(gòu)信息,摘自Uniprot.org。CD161全長為225個氨基酸,保外域?yàn)?7~225,其中含有3對鏈內(nèi)二硫鍵,并存在1個N糖基化位點(diǎn)。

?

圖6 LLT1的結(jié)構(gòu)信息,摘自Uniprot.org。LLT1全長為191個氨基酸,保外域?yàn)?03~184,其中含有2對鏈內(nèi)二硫鍵,并存在2個N糖基化位點(diǎn)。
? ? ? ?考慮到如果我們篩選一種阻斷CD161-LLT1結(jié)合的抗體,N糖基化如果影響了表位的構(gòu)象,那么抗體的結(jié)合也會受到N糖基化的影響。如果付諸于行動,這個修飾的問題是無法繞開的。

二、迷失自我的狂歡
? ? ? ?從CD161在NK細(xì)胞上的調(diào)控模式看,存在順式作用(NK細(xì)胞能在某種刺激條件下,同時表達(dá)CD161和LLT1,抑制自身活性)、反式作用(B細(xì)胞、T細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞表達(dá)LLT1,從而抑制NK細(xì)胞)。阻斷CD161-LLT1的結(jié)合,可以增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性,釋放IFN-γ。
? ? ? ?另一方面,CD161+CD8+的T細(xì)胞,被分類為組織追蹤MAIT(粘膜相關(guān)不變T細(xì)胞),細(xì)胞毒性Tc17細(xì)胞,或者記憶T細(xì)胞,具有組織追蹤和增強(qiáng)的細(xì)胞毒性。記憶細(xì)胞可以對病毒感染、細(xì)菌感染、抗原呈遞細(xì)胞的刺激做出響應(yīng),進(jìn)而上調(diào)細(xì)胞因子,比如INF-γ、IL-17,釋放顆粒酶。
? ? ? ?利用NK細(xì)胞的免疫檢查點(diǎn)機(jī)制,對NK細(xì)胞的抑制解除,以及激活,是一種新的免疫治療的前沿。我在之前的文章(https://mp.weixin.qq.com/s/5bWB41CAyKXi0348XTtIHw),總結(jié)了NK細(xì)胞作為免疫治療的新方向,列舉了一些NK細(xì)胞的激活或抑制型受體。比如激活型的KIR2DS、NKp80、NKp46/44/30、NKG2C/D/E、DNAM-1、CD16a,抑制型的KIR3DL、NKG2A/CD94、CD161/LLT1、PD-1、TIGIT、CD96、LAG3等(圖7、8)。

圖7 NK細(xì)胞表面的抑制型受體(紅)和激活型受體(綠)。ITIM,immuno-receptor tyrosine-based inhibitory motifs,免疫受體中基于酪氨酸的抑制型模體;ITAM,immuno-receptor tyrosine-based activation motifs,免疫受體中基于酪氨酸的激活型模體。KIR,killer Ig-like receptor,殺手細(xì)胞類免疫球蛋白受體。

圖8 NK細(xì)胞受體的分類。在NK細(xì)胞上,順式結(jié)合的CD161和LLT1,與MHC-I結(jié)合,抑制其活性。
? ? ? ?NK細(xì)胞,占PBMC的5~10%,與CD8+ T細(xì)胞,有類似的殺傷活性(cytotoxicity),但是細(xì)胞的標(biāo)記物與CD8+ T細(xì)胞有顯著差異,不表達(dá)CD3和TCR。NK細(xì)胞的抗原特征為CD56+CD3-,其中85%~95%的NK細(xì)胞為CD56dim(暗)CD16ahigh,主要是成熟的殺傷細(xì)胞,高表達(dá)KIR,可分泌穿孔素和顆粒酶,剩余的為CD56bright(亮)CD16alow,有未成熟的NK細(xì)胞,低表達(dá)KIR和NKG2A/CD94。NK細(xì)胞的分類中,還包括抗原呈遞NK(APNK)、輔助NK(NKh)、調(diào)節(jié)NK(NKreg)。
? ? ? ?與T細(xì)胞需要抗原呈遞的過程不同,細(xì)胞毒性NK細(xì)胞是天然免疫系統(tǒng)的一部分,不需要抗原呈遞,組織相容性復(fù)合體(MHC)I類復(fù)合體與NK細(xì)胞結(jié)合,通常激活抑制型的受體(含ITIM,圖7),抑制了NK細(xì)胞的活性,這也是組織細(xì)胞避免被NK細(xì)胞殺傷的機(jī)制。在一部分腫瘤組織中,腫瘤細(xì)胞雖然下調(diào)了MHC-I的表達(dá),規(guī)避了T細(xì)胞的識別,但因?yàn)镸HC下調(diào)激活了NK細(xì)胞的活性,補(bǔ)充了T細(xì)胞的不足。
? ? ? ?NK細(xì)胞的殺傷機(jī)制,稱為“missing self”,即“迷失自我”。也有研究表明,MHC-I可激活NK細(xì)胞(圖8)。因此,NK細(xì)胞的殺傷活性,基于抑制和激活信號的平衡。
? ? ? ?因此,如果不考慮腫瘤內(nèi)環(huán)境的惡劣、腫瘤細(xì)胞對NK細(xì)胞的塑造、調(diào)節(jié)型細(xì)胞的抑制的話,類比NKG2A/CD94,我們也可以將CD161/LLT1加入到這一場NK細(xì)胞“迷失自我的狂歡”中。目前,關(guān)于NK細(xì)胞的抗體(BiKE、TriKE),或者CAR-NK的臨床實(shí)驗(yàn),也在如火如荼進(jìn)行中,也可以給我們一些借鑒。
? ? ? ?然而,我們不能過于樂觀地估計NK細(xì)胞的殺傷,除了血液淋巴瘤,還有腫瘤微環(huán)境的巨大挑戰(zhàn):
? ? ? ?1. 抑制信號,包括抑制型受體介導(dǎo)的(圖7、8),以及抑制型細(xì)胞因子,比如TGFβ、IL-10;
? ? ? ?2. 抑制細(xì)胞,Treg、NKreg、骨髓瘤衍生抑制型細(xì)胞(MDSC)、基質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞;比如,Treg細(xì)胞、MDSC細(xì)胞表達(dá)TGFβ,結(jié)合NK細(xì)胞的TGFR2,從而下調(diào)其表面的NKG2D、NKp30這些激活型受體,使其被激活的能力降低;
? ? ? ?3. 浸潤能力,在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中,未檢測到NK細(xì)胞亞群,但是存在CD161+CD4+、CD161+CD8+的T細(xì)胞。在結(jié)直腸癌中,幾乎完全排除NK細(xì)胞的浸潤;
? ? ? ?4. 腫瘤微環(huán)境中,缺氧、低糖,顆粒酶B的半衰期顯著降低。
? ? ? ?我們可以通過IL-12、IL-15、IL-18,是NK細(xì)胞聚集在腫瘤組織并維持活性。然而,IL-12促進(jìn)CD161的表達(dá),進(jìn)而抑制NK細(xì)胞的活性。IL-15具有促進(jìn)NK細(xì)胞增殖和殺傷活性的能力,但是單獨(dú)使用,并不能維持NK細(xì)胞的滲透能力。

三、小結(jié)
? ? ? ?本期推送,我們給大家介紹了CD161和LLT1,并且講述了CD161在NK細(xì)胞上的調(diào)控模式以及腫瘤微環(huán)境的巨大挑戰(zhàn)。下一期中,我們會接著帶來CD161成藥性的挑戰(zhàn)以及CD161在T細(xì)胞尤其是CD8+的T細(xì)胞的病理機(jī)制。


咨詢熱線:86-0571-87314597
時邁藥業(yè)美國研發(fā)中心
地址:5107 Pegasus Court, Suite L Frederick, MD 21704
時邁藥業(yè)杭州基地
地址: 杭州市濱江區(qū)建業(yè)路511號華創(chuàng)大廈20層
浙ICP備18020885號-1 | 浙公網(wǎng)安備 33010802013098號 Copyright2020 版權(quán)所有:浙江時邁藥業(yè)有限公司  統(tǒng)計報告